旋覆花内酯抑制血管平滑肌细胞炎性应答与阻断NF-κB活化有关

摘要 : 应用免疫细胞化学染色及Western 印迹检测血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells， VSMC) 环加氧酶-2 (cyclo-oxygenase-2， COX-2) 表达、NF-κB抑制蛋白α (IκB-α)水平和NF-κB p65 核转位的变化; 电泳迁移率改变分析(electrophoretic mobility shift assay， EMSA)确定旋覆花内酯(1-o-acetylbritannilactone， ABL) 对核内 NF-κB p65与DNA调控元件的结合活性的影响。结果表明， 脂多糖 (lipopolysaccharide， LPS) 处理的VSMC， p65核转位加快， 细胞核内的NF-κB p65 水平快速升高， 同时伴有IkB-a的减少; 用ABL预处理VSMC后， LPS诱导的p65核转位增加及IκB-α减少受到明显抑制， 抑制作用呈剂量依赖性。EMSA结果显示， LPS处理VSMC， 其核蛋白与含有NF-κB结合位点的探针的结合活性升高; 而用ABL预处理的 VSMC， LPS诱导的核蛋白与探针结合活性的升高受到明显抑制。进而， ABL对NF-κB活化启动的下游炎性基因COX-2表达也具有较强的抑制效果。因此， ABL是一种抗炎物质， 通过抑制NF-κB活化和炎性基因COX-2的表达而减弱或消除LPS诱导的VSMC炎症应答反应。