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5-FU富集人白血病细胞系KG-1a中肿瘤干细胞样亚群细胞


杨 松 钟晓明 张 伶* 高玉洁 骆展鹏 何 鹏
重庆医科大学医学检验系, 临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室、重庆市重点实验室, 重庆400016
摘要 : 摘要  探讨利用细胞周期特异性药物5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-FU)从人白血病细胞系KG-1a中富集肿瘤干细胞样亚群细胞。体外药物敏感试验确定5-FU的最佳作用浓度和作用时间; KG-1a细胞经5-FU药物处理后, 流式细胞术检测存活细胞群中CD34+CD38-亚群细胞比例; 吖啶橙染色观察细胞内的核酸组成; RT-PCR半定量检测细胞内三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2 (ATP-binding cassette superfamily G member 2, ABCG2) mRNA的表达; 半固体培养观察细胞的集落形成能力。结果显示, 50 μg/ml 5-FU作用KG-1a细胞4天后, CD34+CD38-亚群细胞比例提高10倍以上; 吖啶橙染色可见大部分细胞核酸以发出绿色荧光的DNA为主, RNA含量低; 此类细胞高表达ABCG2 mRNA水平; 而药物处理后细胞集落形成数量较未处理细胞明显减少。研究结果表明, 利用5-FU能够杀死增殖期细胞的性质, 成功建立体外药物筛选富集人白血病细胞系KG-1a中肿瘤干细胞样亚群细胞的方法。