微血管内皮细胞的分离、纯化、鉴定及基因转移的研究

摘要 : 用胶原酶消化,梯度高心,LDL-FACS法分离及纯化小鼠肺组织微血管内皮细胞(MLMEC),并根据细胞形态及间接免疫荧光法加以鉴定。纯化后的MLMEC形态为多边形、短梭形,呈鹅卵石样排列 它能摄取RB-DiL-Ac-LDL,从而胞浆内出现亮红色颗粒 用抗PECAM抗体间接免疫荧光染色后细胞接触处呈亮绿色,细胞轮廓清晰可见。用感染法将HSV-TK基因转入MLMEC细胞内,用XTT法显示携带有HSV-TK基因的MLMEC/TK细胞对GCV敏感,引起自杀效应。该分离、纯化及基因转移方法的建立将为研究MLMEC在各种病理状况下的作用及作为基因治疗的载体提供体外模型。