人NK细胞克隆化培养条件的初步探讨

摘要 : 为探讨NK细胞克隆化培养的条件,我们首先将人外周血单个核细胞经rhIL-2诱导,使NK细胞得以扩增后,去除T细胞,得到相对纯化的NK细胞。经有限稀释,在饲养细胞及rhIL-2、PHA及LCM等培养条件下,获得NK细胞的单个克隆并进行鉴定。结果表明,每96孔板可获4-16个CD3~-CD56~+NK克隆,每个克隆的细胞数最多可达2.35×10~4,存活约3-5周。以丝裂霉素C(25μg/ml)作为饲养细胞抑制剂,以rhIL-2 200u/ml、PHA 10μg/ml及10％LCM培养,可获得较多的克隆和细胞数。