重组人Endostatin/MBP融合蛋白片段的构建及体外抑制内皮细胞增殖活性

摘要 : 为了寻找人,endostatin基因的核心作用片段,先用PCR方法从人的肝脏cDNA文库克隆出人endostatin基因。然后,利用限制性内切酶酶切得到5个不同的endostatin基因片段,并将它们构建到大肠杆菌表达载体pMAL-c2上。经转化并由大肠杆菌表达得到rh Endo-statin/MBP 6个不同片段的融合蛋白,用亲和层析技术分离纯化,并分别作用于体外培养的牛肾上腺毛细血管内皮细胞(BCE),检测它们 对内皮细胞增殖的影响。rh Endostatin/MBP不同片段的融合蛋白对经bFGF刺激引起的BCE细胞的快速增殖有不同程度的抑制作用。Endostatin作用的活性片段位于Endostatin 蛋白N 端的第55 -96 氨基酸位置内。