小鼠近曲肾小管上皮细胞的原代培养及P450酶活性测定

摘要 : 采用肢原酶消化和筛网过滤法分离肾小管， 并用Percoll 密度梯度离心法进一步纯化
    肾小管上皮细胞，建立小鼠近曲肾小管丰皮细胞房、代培养方法。利用免疫细胞化学方法鉴定细胞种
    类，通过乙氧基试卤灵0- 脱乙基酶(7-ethox yresorufin -O-deethy lase, ERO D) 活性方法检测0 、1 、3 、7 天肾小管上皮细胞细胞色素P450 (CYPIA l)的活性。细胞染色结果表明，传1 代后98 %的细胞为近曲肾小管上皮细胞，证明此方法是培养小鼠近曲肾小管细胞的有效方法。CYPIA1 在刚分离近曲肾小管上皮细胞中活性较强，在培养24 h 后明显下降， 3 天后基本无活性。