利用HRM技术区分ob糖尿病小鼠不同基因型

摘要 : ob/ob小鼠是糖尿病相关研究中使用最广泛的动物模型之一, 近年来, 市场需求呈上升趋势。与野生型小鼠相比, 其瘦素蛋白基因105号密码子发生C>T点突变, 导致不能产生正常的瘦素蛋白。该模型4周前外观表型与野生型无异, 而ob/ob纯合子不育, 因而在繁殖建系过程中,需要通过基因型鉴定纯合、杂合和野生三种基因型。该文建立了基于高分辨率溶解曲线分析(highresolution melting analysis, HRM)的基因型鉴定方法, 基因型分型结果与常规PCR加酶切方法一致, 也与DNA测序结果吻合; 通过该方法分型后获得纯合子小鼠外观表型、血糖浓度参数符合预期。该方法较常规方法省时、高效、节省实验成本, 可用于大规模ob小鼠繁殖中的基因型鉴定。