大黄鱼肌肉生长抑制素-1前肽原核表达、多克隆抗体制备和功能验证

摘要 : 肌肉生长抑制素(myostatin, MSTN)在动物肌肉的生长和发育过程中起着重要作用。该研究通过RT-PCR从大黄鱼(Larimichthys crocea)肌肉组织中克隆肌肉生长抑制素-1前肽基因(MSTN-1pros), 构建了表达大黄鱼生长抑制素前肽的重组质粒, 并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达, 获得了大黄鱼MSTN-1pros融合蛋白。用分离的重组蛋白免疫大白兔, 制备了抗大黄鱼MSTN-1pros的多克隆抗体。经蛋白免疫印迹法检测, 确定获得的抗体具有较高的特异性。通过对大黄鱼幼鱼的注射实验, 发现注射过MSTN-1pros抗体的大黄鱼增重率比对照组降低了20.71%(P<0.05), 证明MSTN前肽抗体对大黄鱼的生长具有抑制作用。实验结果表明, MSTN前肽蛋白可以用于养殖鱼类的生长调控。