胆固醇嵌入式阳离子脂质体运载基因研究

赵轶男^1,2 张树彪^2* 崔韶晖² 张淑芬^1*

¹大连理工大学精细化工国家重点实验室, 大连 116012; ²大连民族学院生物技术与资源利用国家民委–教育部重点实验室, 大连 116600

摘要 :

阳离子脂质体是一种有临床应用潜力的抗肿瘤药物递药系统, 助类脂能起到稳定双层膜和降低阳性成分毒性的作用, 同时提供阳性类脂的细胞渗透功能。为了进一步发掘助类脂的应用潜力, 该文采用胆固醇(cholesterol)作为助类脂制备阳离子脂质体, 测定了脂质体的粒径及Zeta电位, 脂质体的平均粒径为100~140 nm, Zeta电位为45~60 mV。脂质体分别与绿色荧光蛋白基因(pGFP-N2)、荧光素酶基因(pGL3)结合, 形成脂质体/DNA复合物, 通过载入人喉癌细胞(Hep-2), 考察了其转染效率和细胞毒性。结果表明, 阳离子类脂与胆固醇以1:1、1:2和1:4摩尔比例混合制备脂质体均能高效转染Hep-2细胞。毒性实验显示, 阳离子类脂单独存在时对癌细胞具有一定的细胞毒性, 随着胆固醇的加入, 脂质体对细胞的毒性明显减小, 与商品试剂DOTAP和Lipofectamine 2000相当。