沉默Gpr3基因表达对猪卵泡颗粒细胞凋亡的影响

摘要 : G蛋白偶联受体3(G protein-coupled receptor 3, Gpr3)属于G蛋白偶联受体超家族成员, 能够维持卵泡卵母细胞减数分裂的前期阻滞, 但在卵泡颗粒细胞中的作用不清。该研究利用RNAi技术, 以化学合成的siRNA转染体外培养的猪卵泡颗粒细胞, 并利用Real-time PCR和Western blot技术检验Gpr3基因的沉默效果; 利用MTT(四甲基偶氮唑盐)、流式细胞术和Real-time PCR技术检测沉默Gpr3基因表达对猪卵泡颗粒细胞凋亡以及凋亡相关基因表达的影响。结果显示, Gpr3-siRNA能够有效地抑制猪卵泡颗粒细胞中Gpr3基因mRNA和蛋白的表达(P<0.01); 在沉默Gpr3基因表达后, 猪卵泡颗粒细胞的细胞活性由0.419升高至0.586, 同时细胞凋亡率由2.67%下降至0.42%, 并在显著上调Bcl-2表达的同时, 下调了Bax的表达(P<0.05)。结果表明, 沉默Gpr3基因的表达抑制了猪卵泡颗粒细胞的凋亡, 其机制可能与调控Bcl-2和Bax表达有关。