p85a基因对小鼠大脑皮层投射神经元迁移的影响

摘要 : Pi3k/Akt信号通路是近年来发现的参与细胞增殖、调控的重要通路, Pi3k激活可介导多种细胞功能, Pi3k由p85a和p110构成。该研究通过干扰p85a基因的表达, 探讨其在小鼠大脑皮层投射神经元迁移中的作用。首先, 构建p85a基因的对照质粒(scramble)、siRNA质粒(sip85a-1、sip85a-2)和过表达质粒(OEp85a); 接着转染N2a细胞, 48 h后, 用定量PCR方法检测p85a基因mRNA的表达情况。随后, 将sip85a-1、sip85a-2、OEp85a质粒分别转入小鼠大脑, 4 d后, 借助免疫荧光方法检测皮层神经元的迁移情况。定量PCR结果显示: 与对照相比, 转染sip85a-1、sip85a-2均能显著降低N2a细胞中p85a基因的mRNA表达, 抑制效率约为40%(P<0.05); 而转染OEp85a质粒后, 能显著增加p85a基因mRNA的表达, 约为对照组的12倍(P<0.01)。胚胎电转结果中, 各区EGFP阳性神经元数目定量分析显示, sip85a-1、sip85a-2、OEp85a质粒均能显著抑制神经元的迁移(P<0.05)。大脑发育阶段中, p85a基因在适当范围内, 对平衡神经元迁移过程中起着重要作用。