PiggyBac在转基因小鼠制备中的应用

刘金烨¹ 庄华² 孙瑞林² 费俭^1*

¹同济大学生命科学与技术学院, 上海 200092; ²上海南方模式生物研究中心, 上海 201203

摘要 : 受精卵雄原核裸DNA注射是目前制备转基因小鼠的主要技术, 而转基因表达成功率低是这种技术的主要缺点。piggyBac转座子系统已被报道用于制备转基因小鼠, 但这一方法是否能够提高转基因的表达成功率尚不清楚。为此, 我们利用毛色基因agouti为报告基因, 采用piggyBac转座子系统以C57/BL6小鼠为背景进行转基因小鼠的制备。结果表明, 将piggyBac转座酶cRNA和转基因载体进行受精卵雄原核共注射后, 转基因阳性率为18.4%, 转基因表达率为88.89%,显著高于单独进行转基因载体DNA受精卵雄原核注射法。同时, 利用agouti基因作为报告基因, 可根据毛色变化直接对表达阳性的转基因小鼠进行初步筛选, 提高了筛选效率。