B-Myb稳定过表达H1299细胞株的构建与分析

蔡伟^1,2 王义涛^1,2 朱远远^1,2 王森^1,2 朱慧芳^1,2 雷云龙^1,2 李轶^1,2 张莹^1,2 张春冬^1,2* 卜友泉^1,2*

¹重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室, 重庆 400016; ²重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心, 重庆 400016

摘要 : B-Myb是Myb家族的成员之一, 在细胞周期和癌变过程中具有重要作用。但其在肺癌中的作用及其分子机制仍不清楚。为了研究B-Myb在肺癌中的作用, 构建了B-Myb稳定过表达的H1299肺癌细胞株。流式细胞术和MTT检测的结果表明, B-Myb稳定过表达导致G1期细胞减少, S期细胞增加进而促进细胞增殖; 克隆形成实验及Transwell的结果表明, B-Myb稳定过表达显著增强H1299细胞的克隆形成、侵袭及迁移能力。定量RT-PCR检测结果表明, B-Myb稳定过表达显著提高了细胞周期基因CCNA1的表达水平; 对CD97和MTSS1等细胞运动相关下游基因的表达则无明显影响。该研究成功构建了B-Myb稳定过表达细胞株, 发现了B-Myb过表达可促进肺癌细胞的增殖、侵袭迁移及克隆形成能力, 为进一步研究奠定了基础。