不同浓度TGF-β1对肺泡II型细胞系MLE-12表型及功能的影响

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重庆医科大学附属儿童医院呼吸中心, 儿科学重庆市重点实验室, 重庆市儿童发育重大疾病诊治与预防国际合作基地, 儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室, 400014 重庆

摘要 : 探讨不同浓度及不同时间点TGF-β1对肺泡II型上皮细胞(AECII)表型及功能的影响。小鼠肺泡II型细胞系MLE-12, 随机分为: 对照组(0 ng/mL)、低浓度组(0.1 ng/mL)、中浓度组(1 ng/mL)和高浓度组(10 ng/mL)。应用细胞免疫荧光双标法及荧光定量PCR法观察各组12, 24, 48, 72 h细胞形态变化、AECII标记(肺表面活性物质蛋白B, SP-B)及成纤维细胞标记(成纤维细胞特异性蛋白1, FSP-1)蛋白及mRNA的表达情况。结果表明, 随着TGF-β1干预时间的延长及浓度的升高, AECII逐渐由鹅卵石样变成纺锤体形状, 获得成纤维细胞样外观。蛋白水平, AECII标记SP-B表达逐渐减弱, 成纤维细胞标记FSP-1表达逐渐增强, 48 h中浓度组及24 h高浓度组两者可见明显的共表达, 同时, 其SP-B mRNA表达较同时间对照组下调, 而FSP1 mRNA表达较同时间对照组上调。低浓度组各时间点上述表现不明显。TGF-β1促使AECII向成纤维细胞转化(EMT), 且具有时间及浓度依赖性。