雌激素缺乏导致的骨质疏松发病过程中T淋巴细胞对骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化的影响及与TNF-α的关系

邵秉一^1,2 于洋^1,2 傅潇慧³ 廖立⁴ 金岩⁴ 杨德琴^1,2*

¹重庆医科大学附属口腔医院牙体牙髓科, 重庆 401147; ²口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室, 重庆 401147;³浙江大学医学院附属第二医院滨江院区, 杭州 310003; ⁴第四军医大学口腔病理教研室, 西安 710032

摘要 : 探讨骨质疏松发病过程中T淋巴细胞对骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells, BMMSC)增殖分化的影响。选用健康雌性小鼠行双侧卵巢切除术(ovariectomy, OVX), 建立绝经后骨质疏松模型。选用同一批次健康小鼠行双侧卵巢脂肪组织部分切除, 建立假手术组(sham), Micro-CT确立模型成功建立。将sham组、OVX组、sham+anti-TNFα组、OVX+anti-TNFα组中T淋巴细胞与BMMSC共培养, ELISA检测sham组与OVX组T淋巴细胞上清液中TNF-α表达的差异, MTT法检测四组共培养体系中BMMSC生长曲线; 成骨诱导后碱性磷酸酶和钙化结节茜素红染色法检测BMMSC成骨能力差异; RT-PCR检测小鼠BMMSC成骨相关基因Runx2、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)的表达。结果显示, 与sham组相比, OVX组中BMMSC的增殖受到了抑制, 成骨分化减弱(P<0.05), OVX anti-TNF-α刺激组较OVX组增殖显著升高(P<0.05), 成骨分化能力显著增强(P<0.05)。以上结果证明, 在雌激素缺乏下的T淋巴细胞能影响BMMSC增殖及成骨分化能力, 这可能与T淋巴细胞表达TNF-α增强相关。