周围神经组织液对大鼠EPI-NCSCs体外分化的影响

张路^1,2,3 张洁元¹ 刘彬^2,3 刘争⁴ 李兵仓^1＊

¹第三军医大学大坪医院野战外科研究所, 创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室, 重庆 400042;²西南大学生命科学学院, 重庆 400715; ³淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室, 重庆 400715;⁴重庆医科大学生理学教研室/神经科学研究

摘要 : 为了探讨周围神经组织环境因素对EPI-NCSCs(epidermal neural crest stem cells)分化的影响, 该文用坐骨神经组织提取液为环境因素, 对体外培养的EPI-NCSCs进行分化诱导。以正常培养的EPI-NCSCs为对照组, 细胞培养液成分为: DMEM/F12、10% FBS、2% B27、20 ng/mL bFGF。在细胞培养液中添加1%周围神经组织液作为实验组。MTT结果显示, 周围神经组织液对EPI-NCSCs的活性和增殖无影响; 对照组和实验组EPI-NCSCs都呈多种形态。RT-PCR分析显示, 在对照组和实验组中EPI-NCSCs均表达GFAP、S-100、β-III Tubulin(Tuj1), 但在实验组中, 这3种蛋白的表达量均高于对照组。免疫组化分析显示, 在对照组中, EPI-NCSCs同时表现了雪旺细胞和早期神经元的鉴定特征; 在实验组中, EPI-NCSCs没有神经元的鉴定特征, 只表达雪旺氏细胞的鉴定特征。这表明, 周围神经组织液可以诱导体外培养的EPI-NCSCs向雪旺氏细胞分化。