TBP-like Protein(TLP)通过G2/M期阻滞抑制HeLa细胞的增殖

摘要 : TBP-like protein(TLP)是真核细胞中一种常见的转录因子, 在调节生长发育方面起着重要的作用。该实验构建重组质粒pEGFP-N1-TLP, 研究TLP对人宫颈癌细胞HeLa增殖的影响。利用流式细胞仪检测质粒的转染效率, 通过激光共聚焦显微镜观察外源TLP蛋白的亚细胞定位。经过MTT检测、RNAi-TLP诱导的基因沉默及Hoechst33258染色研究TLP对HeLa细胞的增殖抑制作用。流式细胞术、Western blot和RT-PCR实验结果表明, TLP将HeLa细胞周期阻滞于G2/M期, 并抑制周期相关基因CDK1和CyclinB1的转录和翻译。研究表明, 外源TLP在HeLa细胞的细胞核中表达, 通过降低细胞周期相关基因CDK1和CDK1的表达水平, 将HeLa细胞的细胞周期阻滞于G2/M期, 从而抑制细胞的增殖。