rhddADAM15抑制肝癌细胞Bel-7402增殖的作用研究

摘要 : ADAM15属于跨膜蛋白ADAM家族中的一员, 在乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌等多种实体瘤中均发现其表达量提高。ADAM15在降解细胞外基质、介导细胞的黏附、细胞间信号转导及在肿瘤发展进程中起到重要作用。因其去整合素区域含有RGD序列, ADAM15可与多种整合素相互作用。在前期工作中, 实验组利用大肠杆菌表达系统表达了重组人ADAM15去整合素区域蛋白, 记作rhddADAM15。该研究将进一步针对rhddADAM15抑制肝癌细胞Bel-7402增殖的机理进行分析及探讨。SRB法显示, rhddADAM15可抑制Bel-7402细胞增殖并呈剂量依赖性, IC50为1.14 μmol/L; 利用DAPI核染发现, rhddADAM15可显著诱导Bel-7402细胞凋亡; 流式细胞仪分析发现, rhddADAM15浓度为6 μmol/L时, (87.44±7.25)%的细胞发生凋亡; PI单染分析细胞周期表明, rhddADAM15作用后, 部分Bel-7402细胞周期被阻滞于S期及G2/M期, 并呈剂量依赖性, 4 μmol/L rhddADAM15处理后G0/G1期含量下降约14%; Western blot分析显示, rhddADAM15可下调Bel-7402细胞周期蛋白CDC2的表达, 抑制CDC2-Tyr15的去磷酸化, 引起G2/M期的阻滞。