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沉默DEPDC1基因表达对鼻咽癌细胞系HNE-1生长和细胞周期的影响


何龙霞1 糜 燕1 张春冬2 张 莹2 蔡 伟2 王义涛2 卜友泉2 朱 江1*
1重庆医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科, 重庆 400016; 2重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心, 重庆 400016
摘要 : 为探讨沉默DEPDC1基因表达对鼻咽癌细胞系HNE-1生长和细胞周期的影响, 该实验设计合成靶向DEPDC1的小分子干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)转染人鼻咽癌HNE-1细胞。转染后, 采用荧光定量PCR、免疫印迹、MTT及流式细胞术方法检测细胞内DEPDC1的表达量以及细胞周期、生长增殖、凋亡的变化及其可能机制。结果显示, 转染DEPDC1 siRNA后, DEPDC1基因在mRNA及蛋白水平的表达量明显降低; 大量细胞被阻滞于G2/M期, 生长增殖减慢, 凋亡增加。荧光定量PCR结果表明, 抑制NF-κB激活的A20基因表达量明显上调, 受NF-κB调控的肿瘤相关靶基因的表达量下降, 包括C-MYC、MMP9、ICAM-1、BCL-2基因。由此说明, 沉默DEPDC1基因可以影响HNE-1细胞的周期, 抑制其生长增殖, 促进凋亡, 其机制可能与抑制NF-κB通路有关。