预血管化细胞膜片的构建

摘要 : 为探索新的体外获得毛细血管样网络结构来解决工程化组织预血管化的问题, 该研究将人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells, hMSCs)以9×104/cm2细胞密度体外连续培养形成细胞膜片, 将培养的脐静脉血内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)以5×104/cm2细胞密度接种到上述间充质干细胞膜片上, 并培养在内皮细胞培养介质中。在设计的时间点用倒置相差显微镜观察, 发现内皮细胞在膜片上迁移, 细胞重排, 膜片上的基质蛋白也发生重排, 导致微槽和空泡出现。CD31免疫荧光染色观察到进行性管腔形成的过程; CD90免疫荧光染色显示膜片上的hMSCs围绕着HUVECs周边排列, 说明hMSCs作为周细胞支持了HUVECs的生长; 在培养第10 d可见少量的α-SMA的表达, 暗示着在此种培养模式下, hMSCs具有较低的向肌细胞分化的潜能。这些结果表明, 将内皮细胞接种在未分化干细胞膜片上, 可以在体外形成具有血管网络结构的预血管化膜片, 为构建血管化工程化组织提供了新的思路。