大电导钙激活钾通道对大鼠骨髓间充质干细胞增殖的影响

摘要 : 为了观察开放和拮抗大电导钙激活钾通道(big conductance Ca2+-activated K+ channel,BKca)对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)增殖的影响并探讨其机制, 该研究分离培养了大鼠BMSCs, 采用BKca通道特异性开放剂(NS1619)和拮抗剂(IBTX)干预, MTT、平板克隆测定细胞增殖活力及细胞克隆形成能力; 流式细胞术分析细胞凋亡及细胞周期分布; Western blot、定量PCR检测周期蛋白cyclin D1基因和蛋白表达水平; 整细胞膜片钳技术分析细胞膜电生理特性。结果显示, NS1619干预组与对照组相比, BMSCs细胞膜K+通道外向电流振幅增大, 细胞增殖能力和克隆形成能力增强, 凋亡减少。此外, 开放BKca通道明显促进细胞从G1期向S期过渡, cyclin D1蛋白及mRNA表达上调, 而拮抗BKca通道则相反。推测, BKca通道通过调节细胞周期进程最终影响细胞增殖, 该作用可能与其具有调控细胞膜K+电流的电生理特性有关。