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人eRF3a与survivin相互作用的结构域分析


李 芳 肖瑞琳 柴宝峰*
化学生物学与分子工程教育部重点实验室, 山西大学生物技术研究所, 太原 030006
摘要 : 第二类肽链释放因子eRF3(eukaryotic polypeptide release factor)是一种GTPase, 它促进第一类肽链释放因子eRF1的释放活性, 并与细胞周期调控、细胞骨架组装、细胞凋亡和肿瘤形成等过程相关。哺乳动物细胞中eRF3有两种——eRF3a和eRF3b, 分别由GSPT1和GSPT2(G1 to S phase transition 1/2)基因编码。生存素(survivin)是迄今发现的最强有力的凋亡抑制因子, 具有独特的结构和复杂的功能, 不仅可以抑制细胞凋亡, 还参与细胞有丝分裂、血管的生成等过程。eRF3和survivin都与细胞周期和细胞凋亡的调控相关。该实验室的前期研究表明, eRF3和survivin具有相互作用关系。该研究进一步对eRF3a进行截短突变, 采用酵母双杂交和pull-down两种分析方法依次验证eRF3a(1-72aa)和eRF3a(1-36aa)与survivin的相互作用关系。结果表明, eRF3a(1-72aa)和eRF3a(1-36aa)均可以与survivin相互作用, 由此确定eRF3a与survivin相互作用的最小结构域位于其N末端1-36aa之间, 从而为进一步证实eRF3a的N端结构域与survivin协同作用参与细胞周期和细胞凋亡的调控提供了数据支持。