下调SMU1表达对细胞增殖和DNA双链断裂损伤反应的影响

任来峰^1* 郭莲娣² 石新丽³ 李莎²

¹山西医科大学汾阳学院医学检验系, 汾阳 032200; ²四川大学华西第二医院发育与干细胞研究所, 成都 610041;³河北中医学院微生物与免疫教研室, 石家庄 050200

摘要 : SMU1是一个与细胞基因组复制和RNA剪切过程相关的新基因。该研究为进一步调查SMU1对细胞增殖及DNA双链断裂(DNA double-strand breaks, DNA DSBs)损伤应答的影响, 设计合成针对SMU1基因的小分子siRNA, 并与对照siRNA(scramble)分别转染HEK 293T或U2OS细胞。通过免疫印迹(Western blot)检测证实, siSMU1转染细胞中SMU1的表达显著下降, 采用台盼蓝染色细胞计数检测显示, SMU1表达下调显著降低细胞增殖能力。免疫荧光和免疫印迹法检测结果表明, SMU1表达下调显著增加细胞内源性DSBs损伤(γH2AX foci和蛋白水平均升高); 而进一步用X-ray处理细胞造成外源性DSBs损伤后, SMU1沉默细胞显示出延长的DSBs损伤修复动力学(减缓的γH2AX foci和蛋白水平消退)。以上结果提示, SMU1在细胞DSBs损伤修复反应中扮演重要角色,积极参与细胞基因组完整性的维持。