过表达白鳍鲨硒结合蛋白1对HL-7702细胞镉胁迫的解毒作用

摘要 : 硒结合蛋白1(Selenium-binding protein 1, SBP1)与肿瘤相关, 并可以与重金属镉直接结合。该研究构建了白鳍鲨SBP1重组质粒Myc-SBP1并转染人HL-7702细胞, 利用CCK-8和CFDA SE检测Cd胁迫下的细胞增殖情况, 利用流式细胞仪检测细胞内ROS的水平。结果显示, 过表达白鳍鲨SBP1可拮抗Cd对HL-7702细胞的毒害作用。在100 μmol/L的CdCl2应激下, 表达SBP1组存活率为76.4%, 约为对照组存活率的2倍, 实验组的细胞增殖指数和分裂能力也略高于对照组。一级结构分析表明, 白鳍鲨SBP1具有两个CXXC区域, 为抗氧化位点, 具有2个H×D和3个HXXH保守区域, 它们为推测的Cd结合位点, 为在HL-7702细胞中表达白鳍鲨SBP1蛋白能拮抗Cd的结构基础。此外,ROS检测实验表明白鳍鲨SBP1蛋白能显著降低胞内ROS水平, 提示硒结合蛋白除通过直接与Cd结合降低毒性外, 降低重金属引起的氧化胁迫也可能发挥一定解毒作用。