钙激活性氯离子通道在大鼠低氧高二氧化碳性PASMCs中的表达及与MAPK通路的关系

黄林静^1# 黎关龙^2# 何金波¹ 马迎春¹ 陈丹¹ 应磊¹ 汪洋¹ 王万铁^1*

¹温州医科大学基础医学院病理生理学教研室, 温州 325035;²浙江省医学科学院卫生学研究所毒理学研究室, 杭州 310013

摘要 : 采用酶消化法取雄性SD大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells, PASMCs)进行原代培养, 采用小鼠抗大鼠SMα-actin免疫荧光细胞化学法进行细胞鉴定; 复制低氧高二氧化碳模型, 采用免疫印迹法检测钙激活性氯离子通道(calcium activated chloride channel,CLCA2)蛋白的表达; 采用半定量逆转录–聚合酶链反应(RT-PCR)技术测定CLCA2 mRNA水平的表达。结果显示: 与正常组比较, 低氧高二氧化碳组PASMCs中CLCA2 mRNA和蛋白表达水平均明显上调(P<0.01); 与低氧高二氧化碳组比较, U0126组和SB203580组PASMCs中CLCA2 mRNA和蛋白表达水平均明显上调(P<0.01); 茴香霉素(Anisomycin)组PASMCs中CLCA2 mRNA和蛋白表达水平均显著下调(P<0.05和P<0.01)。研究表明, 低氧高二氧化碳可上调大鼠PASMC中CLCA2 mRNA和蛋白的表达; ERK1/2通路抑制剂(U0126)、P38MAPK通路抑制剂(SB203580)均可上调PASMCs中CLCA2 mRNA和蛋白的表达; MAPK通路激活 (Anisomycin)能下调PASMCs中CLCA2 mRNA和蛋白的表达。