香鱼IL-12B基因序列及其表达与鳗利斯顿氏菌感染的相关性分析

摘要 : 白介素-12B(interleukin-12B, IL-12B)是组成IL-12分子的亚基, 参与病原菌感染引起的免疫反应。该研究经香鱼(Plecoglossus altivelis)巨噬细胞转录组测序获得其IL-12B基因, 包括完整的开放阅读框在内, 序列大小为1 152 bp, 预测编码的前体蛋白由303个氨基酸组成, N-端22个氨基酸残基为信号肽序列。序列比对及进化树分析表明, 香鱼IL-12B与大西洋鲑IL-12B进化关系最近,氨基酸序列同源性达50%。香鱼IL-12B基因mRNA在健康香鱼头肾组织和外周血白细胞中表达量最高, 在脾脏、腮和肠等组织也有少量表达。荧光定量PCR分析揭示, 鳗利斯顿氏 (Listonella anguillarum)感染后, 香鱼头肾组织和外周血白细胞IL-12B基因mRNA表达显著上调, 12 hpi(hours post infection)时达到峰值。随后原核表达了香鱼IL-12B, 并制备抗血清。Western blot结果揭示, 香鱼血清IL-12B含量在鳗利斯顿氏菌感染后4 hpi时尚无显著变化, 8 hpi后显著上调, 并表现持续增加。综上, 香鱼IL-12B基因的表达变化与鳗利斯顿氏菌感染过程密切相关, 揭示香鱼IL-12B基因可能在病原菌感染引起的免疫反应中发挥重要作用。