A2AR基因敲除对小鼠脑缺血再灌注后SVZ区星形胶质细胞激活的影响

摘要 : 通过研究腺苷A2A受体(A2A receptor, A2AR)基因敲除对小鼠局灶性脑缺血再灌注后侧脑室下区(subventricular zone, SVZ)星形胶质细胞(astrocyte, Ast)数目及形态的影响, 为腺苷类药物在脑卒中类疾病中的应用提供实验依据。采用大脑中动脉栓塞法(middle cerebral artery occlusion,MCAO)复制局灶性脑缺血再灌注模型, 动物分为假手术组(S)和模型组(M), 其中M组根据基因类型分为A2AR基因敲除模型组(MKO)和A2AR基因野生模型组(MWT), MKO组和MWT组根据再灌注时间都分为1 d组、3 d组和7 d组, S组分为A2AR基因敲除假手术组(SKO)和A2AR基因野生假手术组(SWT), 共8组; 对实验小鼠进行神经行为学评分, 脑组织用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazoliumchloride, TTC)染色观察脑梗死灶, 苏木素伊红(HE)染色和尼氏(Nissl)染色观察脑组织大体形态, 以及应用免疫荧光法观察SVZ区Ast的特异性标记物胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillaryacidic protein, GFAP)表达。结果显示, 所有M组小鼠在脑缺血再灌注后均出现神经功能缺损症状,神经行为学评分显示MKO 3 d组低于MKO 1 d组(P<0.05); TTC显示M组小鼠脑组织均有白色梗死灶; 免疫荧光结果显示S组小鼠SVZ区域仅有少量Ast表达, M组表达明显增多, MKO 7 d组Ast表达量低于MWT 7 d组(P<0.05); Ast表达与神经行为学评分呈显著负相关(r=–0.621, P<0.01)。结果证明,A2AR基因敲除对小鼠局灶性脑缺血再灌注后, 在急性期能够减轻肢体活动障碍, 在恢复期能够调控Ast的激活, 减少胶质瘢痕形成, 是其促进后期神经再生的可能因素之一。