过表达S100A6对BMP9诱导的小鼠间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化的影响

叶立伟武睿段亮张昀源杨霞陈娴王海燕何通川周兰^*

重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室, 重庆 400016

摘要 : 以骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9, BMP9)作为诱导小鼠间充质干细胞C3H10T1/2定向成骨分化的细胞因子, 观察过表达S100A6对成骨分化的影响。用重组腺病毒AdBMP9与AdS100A6共感染C3H10T1/2细胞, 随后检测成骨分化标志物, 包括Runx2、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)、骨桥素(osteopontin, OPN)和钙盐沉积; 检测方法包括免疫细胞化学、ALP染色、活性分析以及茜素红S染色; 同时, 用Western blot检测β-catenin的表达。过表达S100A6对所诱导的间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化的早期指标Runx2的蛋白水平无明显影响(P>0.05;ICC法), 对第7天的ALP和第18天钙盐的沉积也无明显影响(P>0.05); 但是, 能够引起第12天的OPN升高(P<0.05); 同时, S100A6对BMP9诱导的C3H10T1/2细胞中的β-catenin水平的影响在第3、7天不明显(P>0.05), 但在第12天时可致β-catenin水平下调(P<0.05)。过表达S100A6可促进BMP9诱导的C3H10T1/2细胞中OPN的表达, 但对最终的成骨分化无明显影响。