盐霉素对肝癌HepG2细胞体外增殖和侵袭转移能力的影响

王晶宇^1,3 王一辰² 王丽³ 王志平^1,2*

¹兰州大学生命科学学院, 兰州 730000; ²兰州大学第二医院泌尿外科研究所, 兰州 730030; ³兰州大学基础医学院病理生理学研究所, 兰州 730000

摘要 : 探讨盐霉素对人肝癌细胞HepG2增殖、侵袭转移能力影响的作用机制。MTT法检测盐霉素对肝癌HepG2细胞和正常肝细胞L02增殖的影响; 利用FITC标记的鬼笔环肽进行微丝免疫荧光染色, 激光共聚焦技术获得盐霉素作用下F-actin细胞骨架的形态变化; Transwell小室法测定盐霉素对HepG2细胞体外迁移侵袭能力的变化。Western blot法检测盐霉素对HepG2细胞中β-连环蛋白(β-catenin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达的影响。结果显示,盐霉素抑制HepG2细胞的增殖, 并呈现出时间、剂量依赖效应; 而盐霉素对正常肝细胞L02的增殖抑制作用不明显。经过盐霉素(1 μmol/L和4 μmol/L)处理的HepG2细胞, 迁移和侵袭实验中穿膜细胞数均明显低于对照组(P<0.05), 且以F-actin为基础的微丝骨架结构发生紊乱。盐霉素(4 μmol/L和8 μmol/L)还可明显下调MMP-2、MMP-9及β-catenin蛋白的表达水平(P<0.05)。这些结果提示, 盐霉素能有效抑制人肝癌细胞HepG2的增殖、迁移和侵袭, 其作用机制可能与降低MMP-2、MMP-9及β-catenin蛋白的表达有关。