果蝇Golgin-84在发育中的表达和功能研究

摘要 : 高尔基体形态和结构的维持与真核细胞内的物质运输和细胞正常功能密切相关, 高尔基体蛋白Golgin-84对维持高尔基体形态发挥了重要作用, 但其在发育中的功能尚不清楚。为了研究Golgin-84在果蝇发育中的作用, 成功制备并纯化了抗果蝇Golgin-84的多克隆抗体并成功构建了UASgolgin-84-V5过表达和golgin-84 RNAi转基因果蝇, 并对golgin-84在果蝇发育中的作用作了初步分析。蛋白免疫印迹和免疫荧光染色实验表明: 制备的Golgin-84抗体能特异性识别重组和内源Golgin-84蛋白; Golgin-84与高尔基体蛋白GM130共定位; Golgin-84在果蝇不同发育阶段的各组织中广泛表达, 在睾丸中表达较高。另外发现, 选择性地在果蝇翅膀中抑制Golgin-84表达使得翅脉发育异常; 过表达Golgin-84导致果蝇翅膀生长图式出现缺陷。该实验成功制备了果蝇Golgin-84抗体, 获得了golgin-84转基因果蝇, 并对golgin-84的功能作了初步的分析, 为进一步阐明Golgin-84的作用机制奠定了基础。