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SDF-1/CXCR4在BMP9介导C2C12细胞成骨分化过程中的作用研究


刘 晨 杨丹丹 白慧丽 李宝林 何 方 张汝益 严树涓 施 琼*
重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室, 重庆市重点实验室, 重庆 400016
摘要 : 为了观察SDF-1/CXCR4信号轴在BMP9促C2C12细胞成骨分化过程中的作用, 通过重
    组腺病毒过表达BMP9, 检测对C2C12细胞中SDF-1及受体CXCR4 mRNA和蛋白表达水平的影响;同时利用重组腺病毒或中和抗体干扰SDF-1/CXCR4, 与BMP9先后作用于C2C12细胞, 通过定量测定碱性磷酸酶(ALP)、染色测定ALP表达、免疫细胞化学测定骨钙蛋白(OCN)表达、茜素红S染色测定钙盐沉积、Real-time PCR检测成骨相关转录因子Runx2和Osx的表达、Western blot检测成骨分化信号通路MAPK和Smad的变化。结果显示, BMP9能明显抑制C2C12细胞中SDF-1、CXCR4的表达(P<0.01), 且具有剂量和时间依赖性; 预先干扰SDF-1/CXCR4能明显影响由BMP9介导的早、中期成骨标志物ALP、OCN及早期转录因子Runx2、Osx的表达(P<0.01)和MAPK、Smad信号通路相关蛋白的变化(P<0.05); 外源性SDF-1并不能影响晚期成骨标志物钙盐沉积。提示SDF-1/CXCR4信号轴在由BMP9介导的C2C12细胞成骨分化早、中期过程中发挥重要作用。