线粒体DNA拷贝量降低诱发人支气管上皮细胞钙信号失调

尉　红¹　薛　莲²　李冰燕¹　童　建¹　张增利^1*

¹苏州大学卫生毒理学教研室, 苏州 215123; ²苏州大学职业与环境卫生教研室, 苏州 215123

摘要 : 采用溴化乙锭(EtBr)诱导线粒体DNA(mitochondrial DNA, mtDNA)拷贝量降低的人支气管上皮细胞株(ρ– HBE); Real-time PCR与共聚焦成像表明, 经EtBr诱导60 d并挑取的单克隆细胞株, 其mtDNA拷贝量下降为正常细胞的24%, 成功构建了ρ– HBE。与母本细胞相比, ρ– HBE群体倍增时间延长, 生长速度减慢。流式细胞术检测细胞线粒体膜电位(ΔΨm)下降, 以Fura-2标记胞浆内游离钙, ρ– HBE [Ca2+]i升高; 线粒体解耦联剂FCCP刺激细胞后, 激光共聚焦扫描显微镜动态监测单个活细胞[Ca2+]i变化, 发现[Ca2+]i水平波动幅度小。提示mtDNA拷贝数降低可导致细胞内钙信号调节紊乱。