稳定表达TSC1/TSC2蛋白质复合物的293T细胞系的建立

摘要 : 我们使用Clonetech的同源重组酶连接人TSC1、TSC2全长蛋白编码cDNA ORF到pBudCE4.1真核细胞双元表达载体上, 用脂质体Lipofectamine 2000介导重组质粒pBudCE4.1/TSC2/TSC1导入293T细胞, 用含125 μg/mL Zeocin的培养基筛选稳定表达TSC1/TSC2蛋白的细胞株, 并用Western blot方法鉴定稳转细胞株的稳定性。该实验成功建立了稳定表达TSC1/TSC2蛋白的293T细胞系, 从而为今后研究TSC1/TSC2蛋白的结构与功能提供实验基础。