核仁磷酸蛋白基因突变对K562白血病细胞分化的影响

摘要 : 核仁磷酸蛋白基因(nucleophosmin， NPM1)突变在急性髓系白血病的发生发展中发挥着重要作用， 而与白血病分化阻滞的关系尚未完全阐明。为探讨NPM1基因突变对白血病细胞体外分化的影响， 将携带NPM1 A型突变(NPM1-mA)的表达质粒载体pEGFPC1-NPM1-mA转染白血病K562细胞系， 构建稳定表达NPM1-mA蛋白的细胞株(K562 mA)， 同时设立野生型NPM1转染组(K562 wt)、空载体转染组(K562 C1)和未处理组(K562)为对照。利用豆蔻酰佛波醇乙酯(PMA)诱导各组细胞分化， 瑞氏–吉姆萨染色观察细胞分化的形态改变， 计算诱导分化率; 相差显微镜计数贴壁细胞数量; 流式细胞术分析细胞表面分化抗原CD41的表达。结果显示， PMA作用72 h后， 与对照组相比， K562 mA组细胞的诱导分化率及贴壁细胞数明显降低(P<0.05); 同时， CD41的表达受到显著抑制(P<0.01)。提示NPM1基因突变能够阻滞白血病细胞系K562的体外分化。