锦鲤鳍条组织细胞系的建立及其生物学特性

摘要 : 采用组织块移植培养技术， 对来源于锦鲤(Cryprinus carpiod)鳍条组织的细胞进行原代培养， 建立了锦鲤鳍条组织细胞系， 已稳定传代60多次， 命名为Koi-Fin。锦鲤鳍条组织细胞为成纤维样细胞， 最佳培养基为MEME， 最适血清体积分数为10%， 最适培养温度为25 ºC， 群体倍增时间为43.5 h。该细胞经液氮冷冻保藏12个月后采用台盼蓝染色， 约(80.21±5.84)%的细胞具有细胞活性，复苏细胞生长旺盛。细胞染色体分析显示， 第16代锦鲤鳍条组织细胞的染色体数目为正常二倍体2n=100， 第40代细胞的染色体众数为52。病毒敏感性试验结果表明， Koi-Fin细胞系对锦鲤疱疹病毒(Koi Herpesvirus， KHV)敏感， 可产生典型细胞病变效应， 病毒滴度为107.86±0.51 TCID50/mL。针对锦鲤疱疹病毒胸苷激酶(thymidine kinase， TK)基因设计特异性引物进行PCR检测， 可扩增出病毒靶基因片段。