抗调亡基因bcl-xl过表达提高工程细胞IVCC及目的蛋白表达的研究

摘要 : 用无血清培养基或化学成分明确的培养基生产治疗用重组蛋白已成为趋势。然而，在此条件下凝血因子、糖蛋白激素等微量糖蛋白的表达十分困难， 其主要原因之一是在细胞培养过程中工程细胞大量凋亡造成的细胞密度低和生存期短。通过将早期抗凋亡基因导入工程细胞并进行过表达可改善工程细胞的活细胞密度积分(integral viable cell concentration， IVCC)， 提高表达量。该研究将bcl-xl基因导入工程细胞， 筛选其高表达细胞株， 并验证工程细胞的抗凋亡能力， 获得了稳定表达抗凋亡蛋白和目的蛋白的工程细胞株。与母细胞相比， 稳定表达Bcl-xL的工程细胞的IVCC提高了50%， 最终目的蛋白表达增加超过200%， 显示抗凋亡基因bcl-xl的过表达可改善工程细胞在无血清悬浮培养过程中的细胞凋亡， 提高表达量， 为表达人凝血因子、糖蛋白激素等微量糖蛋白奠定了基础。