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细菌诱导对昆虫细胞系NIH-SaPe-4生长与抗菌蛋白活性的影响


宁 超 冯 颖* 丁伟峰 孙 龙 何 钊 张 欣
中国林业科学研究院资源昆虫研究所, 国家林业局资源昆虫培育与利用重点实验室, 昆明 650224
摘要 : 离体昆虫细胞系在昆虫免疫、抗菌肽及蛋白研究和药物开发方面具有较好的应用前景。该文对双翅目麻蝇科麻蝇成虫卵巢胚细胞系NIH-SaPe-4在藤黄微球菌诱导和非诱导条件下,细胞密度和活力的变化、诱导对细胞生长的影响、抗菌活性及其活性随时间的变化关系等进行了研究, 并对所得抗菌蛋白进行了初步分离纯化和稳定性评估。结果表明, 诱导使得细胞密度增长减缓, 活力变弱。诱导和非诱导组细胞均可产生对3种革兰氏阳性菌具有抑菌活性的抗菌蛋白, 其中对藤黄微球菌的抑菌活性最明显; 诱导组细胞抗菌蛋白活性出现时间、稳定期抑菌活性均大于非诱导组, 诱导菌消失一段时间后抗菌活性恢复到同等水平。抗菌蛋白具有酸碱稳定性和热稳定性。2组抗菌蛋白粗提液经凝胶、反相分离纯化后均得到一种60 kDa左右的抗菌蛋白, 诱导组电泳后条带亮度大于非诱导组。该研究为昆虫细胞抗菌蛋白性质、分离纯化等研究奠定了科学基础。