E3泛素连接酶基因CG4911敲除和功能的初步研究

叶晓蕾¹　樊晓兰¹　王爽爽¹　张　岩²　金龙金³　林鑫华^2*

¹温州医学院眼视光学院, 温州 325027;²中国科学院动物研究所生物膜与膜生物工程国家重点实验室、干细胞与发育生物学重点实验室, 北京 100101; ³温州医学院检验医学院、生命科学学院, 温州 325035

摘要 : 蛋白质的泛素化是一种重要的翻译后修饰过程，参与调控细胞周期、基因转录、信号转导、炎症反应和干细胞的维持等过程。泛素连接酶E3(ubiqutin ligase)是泛素化过程中关键酶。但许多E3基因在发育中的功能和作用机制还不明确。该研究以黑腹果蝇为模式动物，研究泛素连接酶家族一个重要基因CG4911的功能及分子机制。获得CG4911基因敲除果蝇， CG4911敲除果蝇纯合子可活。原位杂交结果显示， CG4911在胚胎发育早期表达。通过构建CG4911-pUAST-3HA重组子转染Hela细胞，确定CG4911定位于细胞质中，其表达并无修饰作用，并且过表达基因CG4911可导致背板发育缺陷。该研究首次获得了CG4911基因敲除果蝇和CG4911转基因果蝇，并初步探索了F-box基因CG4911的功能，为进一步阐明泛素连接酶的功能及分子机制提供了科学依据。