福安泰-03对人脐静脉内皮细胞凋亡和小鼠创伤愈合的影响

摘要 : 研究福安泰-03(Fuantai， FAT-03)对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells， HUVECs)凋亡和小鼠创伤愈合的影响。MTT法检查FAT-03对HUVECs和人低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)生长的影响; 聚碳酸酯膜小室趋化运动模型(Transwell model)检测FAT-03对HUVECs运动能力的影响; 荧光显微镜观察FAT-03作用下HUVECs的形态变化; 膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-fluorescein isothiocyanate， Annexin V-FITC)双染检测FAT-03对HUVECs早期凋亡的影响; 流式细胞术分析FAT-03对HUVECs周期及凋亡的影响; Western blot法分析FAT-03对HUVECs的血管内皮细胞生长因子(VEGF)、Bcl-2、Bax表达的影响; 小鼠背部创伤模型检查FAT-03对组织修复的影响; 免疫组化法检查FAT-03对创伤组织微血管密度(microvessel density， MVD)和VEGF表达的影响。结果显示， FAT-03明显抑制HUVECs细胞的增殖和迁移， 其抑制效果与剂量和作用时间相关， 作用HUVECs 24， 48， 72 h的IC50值为0.22， 0.17， 0.09 mg/mL， 但FAT-03对CNE-2Z细胞的生长却无明显的影响; 0.16 mg/mL FAT-03作用HUVECs 24 h对细胞迁移的抑制率为57.9%(P<0.01); FAT-03处理HUVECs 48 h， 细胞的早期凋亡率增加(P<0.05); FAT-03阻滞HUVECs于G0/G1期， 并呈现典型的凋亡峰; 0.16 mg/mL FAT-03作用48， 72 h， HUVECs的凋亡率分别为14.6%、41.7%; FAT-03下调HUVECs的VEGF和抑凋亡基因Bcl-2的表达， 上调促凋亡基因Bax的表达， 其效果与剂量相关。FAT-03明显延迟小鼠创伤的愈合， 且其作用与剂量相关。FAT-03组小鼠创伤周围组织微血管密度和VEGF阳性表达细胞都明显减少。因此， 可以推测， FAT-03抑制HUVECs增殖并诱导其凋亡; 抑制创伤组织的血管生成， 进而延迟创伤愈合; 它的这些作用可能与其下调VEGF、Bcl-2的表达， 上调Bax的表达相关。