肝细胞生长因子基因转染对人淋巴瘤细胞凋亡的影响

沈蓉蓉¹　郑筱娇¹　岑　东^1,2*　赵　行¹　滑世轩¹　裴仁治³　吕建新¹　涂植光⁴

¹温州医学院, 浙江省医学遗传学重点实验室, 温州 325027; ²浙江省鄞州疾病预防控制中心, 宁波 315100; ³浙江省鄞州人民医院血液科, 宁波 315040; ⁴重庆医科大学医学检验系, 教育部 “临床检验诊断学” 重点实验室, 重庆 400016

摘要 : 探讨肝细胞生长因子(HGF)基因转染人淋巴瘤细胞系Raji细胞后，拮抗足叶乙甙(VP-16)诱导细胞凋亡的研究。将三种细胞: 未转染Raji细胞、空载体pVITRO2-mcs转染细胞和HGF基因转染细胞，分成正常对照组和经VP-16处理的药物组。采用Western blot法验证HGF蛋白的表达;CCK-8法检测诱导Raji细胞凋亡的药物浓度; 通过透射电镜、流式细胞术、吖啶橙(AO)染色、苏木精–伊红(HE)染色等方法观察Raji细胞的凋亡情况，并进行相关分析。结果显示: Western blot法验证了HGF蛋白质的表达; CCK-8法显示100 μg/mL足叶乙甙可明显抑制Raji细胞增殖; 透射电镜下可发现典型的凋亡细胞; 流式检测结果表明: 给药组与正常组相比，三组细胞的凋亡率明显升高(P<0.01)，提示VP-16具有诱导细胞凋亡的作用; 但给药组间: HGF基因转染组凋亡率明显低于未转染组(P<0.05)和空载体pVITRO2-mcs转染组(P<0.05)，提示HGF基因转染可明显抑制VP-16诱导的Raji细胞的凋亡， AO染色和HE染色结果也同样提示HGF具有拮抗VP-16诱导的细胞凋亡效应。