核糖体蛋白rpS6在核仁中的定位与其磷酸化无关

摘要 : 核糖体蛋白S6(rpS6)是核糖体小亚基40S的一个组成成分。在该研究中， 利用免疫荧光和邻位连接技术证明rpS6不仅是核糖体小亚基的组成成分， 而且还可与核仁中的U3核蛋白复合体的标志性蛋白Mpp10共定位并且存在相互作用。rpS6蛋白的C端有5个丝氨酸磷酸化位点， 为了研究rpS6蛋白在核仁中的分布是否与其磷酸化有关， 构建了rpS6蛋白的两个突变体rpS6A和rpS6D分别与EGFP和HA的融合蛋白。rpS6A是将C端的5个丝氨酸位点全部突变为丙氨酸; rpS6D是将C端的5个丝氨酸位点全部突变为天冬氨酸。研究表明: rpS6、rpS6A和rpS6D与EGFP和HA的融合蛋白均可分布在核仁中， 与内源性rpS6蛋白的分布情况一致， 说明rpS6蛋白在核仁中的定位与其磷酸化无关， 为探索rpS6蛋白在核仁中的功能奠定了良好的基础。