人参皂苷Rg1调控神经干细胞衰老作用及机制探讨

摘要 : 用三丁基过氧化氢(t-BHP)构建神经干细胞(NSC)体外衰老模型， 探讨人参皂苷Rg1延缓NSC衰老的作用及机制， 为寻找延缓NSC衰老新途径提供理论和实验依据。将从新生SD大鼠海马组织中分离纯化的第三代NSC随机分为五组。对照组: 在NSC完全培养基中培养2 h; 衰老模型组:在对照组基础上加入终浓度为100 μmol/L的t-BHP培养2 h; Rg1组: 在对照组基础上加入终浓度为10 μg/mL的Rg1培养2 h; Rg1抗衰老组: 在衰老造模同时加入终浓度为10 μg/mL的Rg1培养2 h; Rg1治疗衰老组: 终浓度为100 μmol/L的t-BHP培养2 h后再加入终浓度为10 μg/mL的Rg1继续培养2 h。MTT法、神经球计数、分化细胞计数以及衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色阳性神经球计数分析Rg1调控NSC衰老的生物学作用， RT-PCR检测衰老相关基因p16INK4a、p21Cip1/Waf1 mRNA的表达。结果显示， 与衰老组比较， Rg1抗衰老组和治疗衰老组NSC的增殖能力和多向分化能力显著增强;衰老特异性SA-β-Gal染色阳性神经球百分比显著降低， p16INK4a、 p21Cip1/Waf1 mRNA的表达显著下降。提示Rg1具有延缓t-BHP诱导NSC衰老的作用， 其机制可能与下调p16INK4a、p21Cip1/Waf1的表达有关。