细胞因子信号传导抑制蛋白1对抑瘤素M诱导的肾小管上皮细胞转分化的影响

摘要 : 观察细胞因子信号传导抑制蛋白1(suppressors of cytokine signaling， SOCS-1)对抑瘤素M(oncostatin M， OSM)诱导的肾小管上皮细胞转分化的影响。体外培养人肾近曲小管上皮细胞(HKC)， 应用脂质体2000分别转染pCR3.1/SOCS-1表达质粒和pCR3.1空质粒载体， G418筛选阳性克隆， 应用OSM(10 ng/mL)进行刺激。培养48 h后收集细胞及上清液， 分别采用Western蛋白印迹检测细胞角蛋白18(cytokeratin18， CK18)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin， α-SMA)、SOCS-1和磷酸化信号转导及转录激活因子1(phospho-signal transducers and activators of transcription， p-STAT1)的表达; 采用酶联免疫吸附实验测定细胞上清液中I型胶原(collagen I， Col I)和纤维连接蛋白(fibronectin， FN)的分泌; 采用逆转录-聚合酶链反应检测CK18、α-SMA mRNA的表达。结果显示，与对照组相比， OSM组肾小管上皮细胞α-SMA及p-STAT1蛋白的合成增加， α-SMA mRNA表达增加，细胞培养上清液Col I和FN的含量增加， 而CK18蛋白及mRNA的表达减少。SOCS-1过表达能抑制OSM刺激引起的α-SMA和p-STAT1的表达， 减少Col I和FN的分泌， 下调α-SMA mRNA的表达， 同时能够逆转OSM刺激引起的CK18蛋白及mRNA的表达。由此可见， SOCS-1过表达能抑制OSM诱导的肾小管上皮细胞转分化， 此过程可能与STAT1的磷酸化受抑有关。