两种微量RNA扩增方法的比较研究

摘要 : 本研究通过比较体外转录和单引物扩增这两种扩增微量RNA的不同方法， 以寻找一种高效的扩增方法。我们用两种不同方法分别扩增小鼠大脑全皮层及第五皮层细胞的RNA， 扩增的RNA合成cDNA后进行荧光定量PCR实验， 根据PCR结果比较两种不同扩增方法的效率。WTovation扩增RNA的效率约为IVT效率的2.8倍; IVT方法扩增后， 基因D-Ct值与引物距离mRNA 3’端的长度及mRNA的长度均存在正线性相关(P<0.05)， 即引物距离mRNA 的3’端越近、mRNA越短，基因D-Ct值越低。而WT-ovation方法扩增后， 基因D-Ct值与引物距离mRNA 3’端的长度及mRNA的长度均不存在统计学相关性。与IVT方法相比， WT-ovation方法效率更高， 扩增时受影响因素较少、更稳定。