Survivin 介导的条件复制型溶瘤腺病毒表达IL-24 蛋白对人肝癌细胞PLC 作用机制探究

蒋　海¹　丁鑫鑫²　刘鸿³　谢宏霞¹　章康健^1*

¹ 浙江理工大学生命科学学院新元医学与生物技术研究所, 杭州 310018; ²浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所, 杭州 310018; 3 浙江大学医学院病理学与病理生理学系, 杭州 310058)

摘要 : 条件复制型溶瘤腺病毒Ad.sp-E1A_(Δ24)-IL-24对人肝癌细胞株PLC的作用机制尚不清楚。采用流式细胞仪检测PLC 经PBS、Ad.sp-E1A_(Δ24)以及Ad.sp-E1A_(Δ24)-IL-24 处理48 h 后细胞周期的变化; 利用Western blot 检测PLC 经PBS、Ad.sp-E1A_(Δ24)以及Ad.sp-E1A_(Δ24)-IL-24 处理24 h、48 h 后细胞中凋亡信号相关蛋白表达量的变化。实验结果表明: Ad.sp-E1A_(Δ24)和Ad.sp-E1A_(Δ24)-IL-24 能将PLC 细胞周期阻滞在S 期，其值分别为43.74%±6.61%， 49.48%±7.60%，两者与未感染病毒的对照组(18.91%±1.83%)进行统计学差异分析， P 值均<0.05; 同时， Western blot 检测发现随着处理时间的增加，病毒处理组中CHOP 的表达量、caspase 12 的剪切水平及STAT3、p38 MAPK 的磷酸化水平都有明显提高，尤其以Ad.sp-E1A_(Δ24)-IL-24 处理组较为明显。SOCS3 的表达量病毒处理组与对照组没有显著差异。上述结果表明重组腺病毒Ad.sp-E1A_(Δ24)-IL-24 能有效阻滞PLC细胞周期在S 期，并可能通过内质网压力、STAT3 与MAPK 信号通路等多种途径诱发PLC 细胞凋亡。