膜胆固醇对重组创伤弧菌溶细胞素活性的影响

丁　卉¹　潘娌妮¹　郭　秋¹　楼永良^1*　严杰²　伍　越¹　王福乐¹

¹温州医学院检验医学院, 浙江省医学遗传学重点实验室, 温州325035;²浙江大学医学院病原生物学教研室, 杭州310031

摘要 : 研究膜胆固醇对重组创伤弧菌溶细胞素(recombinant Vibrio vulnificus hemolysin，rVvhA)生物学活性的影响，以进一步明确rVvhA的分子致病机制。利用甲基-β- 环糊精(MβCD)可以去除细胞膜上胆固醇的能力， rVvhA作用细胞之前，细胞预先经5 mmol/L MβCD处理。测定MβCD预处理组和未处理组(即rVvhA直接作用组)细胞的存活率、细胞内钙离子浓度、培养上清中钾离子浓度及细胞凋亡与坏死情况。结果显示MβCD预处理组的细胞存活率较rVvhA直接作用组高、rVvhA引起的钙离子内流和钾离子释放受到抑制、细胞凋亡率也明显降低。结果表明，在rVvhA活性发挥中细胞膜上的胆固醇是必须存在的，胆固醇的降低会抑制rVvhA的活性。