稳定表达Mcm6-GFP 细胞株的建立

李金龙¹ 蔡于琛^2,3 胡志明^1* 高基民^1*

¹ 南方医科大学生物技术学院生物治疗研究所, 广州 510515; ²华南肿瘤学国家重点实验室, 广州 510060;³中山大学肿瘤防治中心, 广州 510060

摘要 : 采用RT-PCR 的方法扩增人Mcm6 基因，克隆入真核表达载体pEGFP-N3，成功构建了pEGFP-Mcm6真核表达质粒，酶切及DNA测序证实了构建质粒序列的正确性。脂质体介导转染Hela 细胞后，荧光显微镜可检测到绿色荧光信号，通过G418 筛选最终获得了稳定表达的细胞株，Western blot 验证了稳定表达细胞株中Mcm6-GFP 融合蛋白的表达。本实验成功建立了稳定表达Mcm6-GFP 融合蛋白的细胞株，为动态观察Mcm6 细胞定位的变化，进一步研究抗肿瘤药物的作用机制提供了有效的分子工具。