秀丽线虫中p53/cep-1 基因克隆、表达及其对寿命的影响

摘要 : Caenorhabditis elegans 中的cep-1基因与哺乳动物中的肿瘤抑制因子p53同源， 能够引发由DNA 损伤导致的细胞凋亡。cep-1 基因与寿命的关系研究并不多。我们利用C.elegans 的cDNA进行PCR扩增得到cep-1的片段并构建到表达载体以及RNA干扰载体上， 经过IPTG诱导表达得到了约90kDa 的CEP-1 融合蛋白。同时对C.elegans 三种虫株:野生型， daf-2(e1370)， daf-16(e1038)进行RNAi (RNA-mediated interference)， 发现cep-1 RNAi之后野生型的寿命显著延长， 另外两种虫株的寿命没有显著改变， 并以RT-PCR的方法检测了cep-1 在这三种虫株中的表达情况。