miR-145-5p靶向XBP1对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和凋亡的影响
李响 张刚 吴志贤 李晨浩 莫自增*
该文探究miR-145-5p靶向内质网应激相关蛋白剪接型X盒结合蛋白1(XBP1)对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和凋亡的影响。选择人瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFB)为研究对象, 随机分组分为: Control组(常规培养)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-145-5p mimics组(转染miR-145-5p mimics)、miR-145-5p mimics+pcDNA-NC组(转染miR-145-5p mimics+pcDNA-NC), miR-145-5p mimics+pcDNA-XBP1组(转染miR-145-5p mimics+pcDNA-XBP1), 另选取人正常皮肤成纤维细胞(NFB)作为NFB组。CCK8检测细胞增殖; 划痕实验检测细胞的迁移; 流式细胞仪检测细胞凋亡率; qPCR法检测细胞miR-145-5p、XBP1 mRNA表达; Western blot检测细胞中Col-I、Col-III、P21、Bax、XBP1蛋白的表达; 双荧光素酶实验检测miR-145-5p与XBP1互作。建立患者来源的异种移植模型, 用miR-145-5p mimics、pcDNA-XBP1进行干预, 观察小鼠植入物生长、凋亡和Col-I表达情况。结果显示, 与NFB组相比, Control组细胞miR-145-5p表达水平降低(P<0.05), XBP1 mRNA表达水平明显升高(P<0.05); 与Control组、miR-NC组相比, miR-145-5p mimics组细胞miR-145-5p表达水平和P21、bax蛋白表达水平及凋亡率升高(P<0.05), XBP1 mRNA表达水平和存活率、克隆数、划痕愈合率及Col-I、Col-III、XBP1蛋白表达水平降低(P<0.05); 与miR-145-5p mimics+pcDNA-NC组相比,miR-145-5p mimics+pcDNA-XBP1组细胞XBP1 mRNA表达水平、存活率、克隆数、划痕愈合率及Col-I、Col-III、XBP1蛋白表达水平升高(P<0.05), P21、bax蛋白表达水平以及凋亡率降低(P<0.05); miR-145-5p可靶向负调控XBP1表达(P<0.05)。过表达miR-145-5p抑制体内KFB增殖和Col-I表达, 诱导细胞凋亡, 上调XBP1减弱了miR-145-5p过表达对体内KFB增殖、凋亡的影响(P<0.05)。总之, miR-145-5p可能通过靶向调控XBP1表达, 进而抑制KFB细胞增殖, 促进细胞凋亡。
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