粉防己碱通过miR-149-5p/HMGA2轴调节食管癌 细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭

该文旨在探讨粉防己碱(Tet)通过miR-149-5p/高迁移率族蛋白A2(HMGA2)轴对食管 癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。qRT-PCR检测食管癌细胞系(EC9706、Eca109、TE-13、 TE-1)以及正常食管上皮细胞(HEEC)中miR-149-5p、HMGA2 mRNA表达水平, 筛选最佳细胞系进 行后续实验; 分别用不同浓度(5、10、20 μmol/L) Tet处理筛选得到的最佳细胞系EC9706 48 h, 利用 CCK-8法检测细胞的存活率获得合适的Tet浓度; 取对数生长期EC9706细胞, 随机分为对照组、Tet 组、Tet+抑制剂阴性对照(inhibitor NC)组、Tet+miR-149-5p抑制剂(miR-149-5p inhibitor)组, qRT PCR检测各细胞中miR-149-5p、HMGA2 mRNA表达水平; 流式细胞术检测各组细胞凋亡; Western blot检测间充质标志物N-钙黏蛋白(N-cadherin)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)、HMGA2、E-钙黏 蛋白(E-cadherin)、细胞周期素D1(CyclinD1)表达水平; Transwell测定细胞迁移与侵袭情况; CCK-8 法检测细胞增殖情况; 双荧光素酶实验检验miR-149-5p、HMGA2靶向关系。10 μmol/L Tet为该 研究最佳浓度。HMGA2为miR-149-5p的靶向结合位点。与HEEC细胞相比, 食管癌细胞系中miR 149-5p表达水平显著降低, HMGA2 mRNA表达水平升高(P<0.05), 其中EC9706细胞中两者水平变 化最为显著, 因此, EC9706细胞作为后续实验的最佳实验细胞。与对照组相比, Tet组EC9706细胞 24 h、48 h的D450值, 迁移与侵袭细胞数, CyclinD1、N-cadherin、HMGA2表达水平显著下降, 凋亡 率及Bax、E-cadherin表达水平显著上升(P<0.05); 与Tet+inhibitor NC组相比, Tet+miR-149-5p in hibitor组EC9706细胞24 h、48 h的D450值, 迁移与侵袭细胞数, CyclinD1、N-cadherin、HMGA2表达 水平显著上升, 凋亡率及Bax、E-cadherin表达水平显著下降(P<0.05)。Tet可能通过上调miR-149 5p, 抑制HMGA2表达, 进而诱导食管癌细胞凋亡, 抑制其增殖、迁移和侵袭。

CSTR: 32200.14.cjcb.2025.06.0015